美德声生物素(维生素H)免疫亲和纯化柱
产品概述
生物素(维生素H)是生物体必需的微量营养素,在药品、保健品及细胞培养等领域需进行含量测定。然而,复杂样品基质中生物素含量较低,直接采用HPLC-UV法常因灵敏度或选择性不足而难以准确定量。本免疫亲和柱针对这一问题设计,可在HPLC分析前对生物素进行选择性净化和富集。本产品的核心原理是利用生物素与特异性抗体之间的高亲和力结合。样品提取液通过免疫亲和柱时,生物素被选择性保留在凝胶介质上,而绝大多数基质干扰物随流出液去除;随后使用HPLC级甲醇将结合在柱上的生物素洗脱,得到净化且浓缩的待测溶液。该过程将免疫亲和层析的高选择性与柱后荧光衍生化的高灵敏度相结合,为生物素准确定量提供了可靠的前处理基础。产品适用于维生素片、液体维生素制剂、细胞培养提取物等样品,可与HPLC-FLD系统联用,通过FITC-链霉亲和素标记实现荧光检测。其操作流程清晰、标准化程度高,能够帮助实验室提高样品处理效率和分析结果可靠性,广泛应用于药品质量检验、食品营养分析及生命科学研究等领域。
产品特点
✓采用免疫亲和层析技术,对生物素具有高选择性,可有效降低复杂基质干扰。
✓柱上富集与洗脱一体化设计,简化样品前处理流程,明显节省操作时间。
✓采用小体积洗脱设计,样品浓缩效果明显,适配低浓度生物素检测。
✓与HPLC-FLD联用并配合柱后荧光标记,检测灵敏度和准确度较高。
✓回收率大于85%,结果重复性好,满足常规实验室质量控制需求。
✓适用于维生素片、液体维生素制剂、细胞培养提取物等多种样品类型,通用性良好。
技术参数
✓产品名称:生物素免疫亲和纯化柱
✓产品货号:EFSA3175
✓规格:3mL/支
✓净化原理:免疫亲和层析
✓检测方法:HPLC-FLD,柱后FITC-链霉亲和素衍生化
✓线性范围:每次进样5–40ng生物素,R2=0.994
✓检出限:每次进样2ng生物素(信噪比3倍)
✓定量下限:样品中生物素10ng/g(LOQ)
✓回收率:大于85%(0.1–5µg生物素)
✓适用样品:维生素片、液体维生素制剂、细胞培养提取物等
适用场景
✓复合维生素片及多维生素制剂中生物素含量测定。
✓液体维生素营养补充剂的质量检验。
✓细胞培养提取物中生物素水平的分析。
✓食品、保健品、药品生产企业质检实验室的样品净化与富集。
✓科研机构开展生物素相关代谢研究时的样品前处理。
使用方法
✓样品制备:称取25g维生素片等样品,溶于100mLPBS中,必要时经0.45µm滤膜过滤,得到样品提取液。
✓上样富集:取4mL提取液,用PBS稀释至20mL,加入免疫亲和柱顶部储液槽,控制流速为1–3mL/min。
✓洗涤:待样品全部通过凝胶后,加入5mLPBS洗涤柱床,并除去柱内残留液体。
✓洗脱:移除储液槽,先加入1mLHPLC级甲醇,通过后等待30秒;再加入2mL甲醇继续洗脱,合并全部甲醇洗脱液。
✓浓缩与复溶:洗脱液可直接进样;若浓度较低,可在50°C下蒸发浓缩1小时,用0.4mLHPLC流动相复溶。
✓仪器检测:采用HPLC-FLD系统,激发波长495nm,发射波长518nm,柱后加入FITC-链霉亲和素溶液进行衍生化荧光检测。