美德声布鲁氏菌琼脂基础
产品概述
布鲁氏菌琼脂基础培养基是一种按照布鲁氏菌生长需要配制的干粉培养基,用于布鲁氏菌属多个生物型的选择性分离。配方中的蛋白胨和肉浸粉提供氮源与氨基酸,葡萄糖提供碳源,氯化钠维持适合的渗透压,琼脂作为凝固剂。培养基在25℃条件下成品pH为7.5±0.2,符合布鲁氏菌基础培养要求。
产品可用蒸馏水直接配制,经高压蒸汽灭菌后冷却至45-50℃,再补充灭活马血清、葡萄糖和布鲁氏菌添加剂即可制备成平板,适用于临床、兽医学等多类标本中布鲁氏菌的分离培养。
布鲁氏菌感染样本中常伴随其他杂菌,直接培养容易影响目标菌的观察。本产品所推荐流程要求在灭菌降温后的基础培养基中添加灭活马血清、无菌葡萄糖和布鲁氏菌添加剂,其中多黏菌素B、杆菌肽、万古霉素等可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌,放线菌酮和制霉菌素用于抑制真菌,萘啶酸可抑制部分肠道杂菌,从而降低干扰杂菌的数量,使布鲁氏菌在平板上获得更好的生长空间。
该流程兼顾了布鲁氏菌的营养需求和样本中杂菌的控制,适合作为布鲁氏菌常规分离培养基的基础。按推荐条件培养时,布鲁氏菌在平板上形成直径约1至2毫米、边缘圆整的凸起菌落。对可疑菌落可继续采用玻片凝集试验、硫堇耐受试验和碱性复红耐受试验等方式进行种别推断,为布鲁氏菌病的实验室诊断与人畜共患病监测提供依据。
脱水培养基外观为浅米色、自由流动均匀粉末;配制成平板后呈浅琥珀色并带轻微乳光。产品经过典型菌株质量控制,包括流产布鲁氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长或抑制验证,便于使用者确认培养基性能。
产品特点
✓干粉配方组成明确,每升培养基含蛋白胨10.0克、肉浸粉5.0克、葡萄糖10.0克、氯化钠5.0克、琼脂15.0克,配制时称量45.0克干粉加水至1升即可。
✓按推荐流程加入灭活马血清、无菌葡萄糖和布鲁氏菌添加剂,能够对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及真菌等非目标微生物形成抑制作用,便于布鲁氏菌分离。
✓布鲁氏菌添加剂含有六种活性成分——多黏菌素B、杆菌肽、万古霉素、萘啶酸、放线菌酮和制霉菌素,兼顾不同类型杂菌抑制需要。
✓在36±1℃和10%-20%二氧化碳环境中培养72至96小时,可观察到直径约1至2毫米、边缘圆整的凸起菌落,形态特征明确,易于识别。
✓质量控制菌株结果显示,流产布鲁氏菌ATCC 4315生长良好,金黄色葡萄球菌ATCC 25923和大肠杆菌ATCC 25922受到抑制,便于开展培养基性能验证。
✓配制过程经过121℃高压灭菌15分钟,之后在45-50℃条件下补加添加成分,操作流程符合微生物培养基常规制备规范,可支持实验室批量制备。
技术参数
✓产品名称:布鲁氏菌琼脂基础培养基
✓产品编号:610079/620079
✓典型配方:蛋白胨10.0g/L,肉浸粉5.0g/L,葡萄糖10.0g/L,氯化钠5.0g/L,琼脂15.0g/L
✓成品pH:7.5±0.2(25℃)
✓配制比例:称取干粉45.0g,加入蒸馏水或去离子水定容至1L
✓灭菌条件:121℃高压蒸汽灭菌15分钟
✓补充添加剂:布鲁氏菌添加剂Code81003,每瓶可供500mL培养基使用;1L培养基需2瓶,以10mL甲醇与无菌蒸馏水按1:1比例配制的溶液复溶
✓培养条件:分离培养36±1℃、72-96小时、10%-20%二氧化碳;质量控制培养36±1℃、24-72小时、5%-10%二氧化碳
✓质量控制菌株:流产布鲁氏菌ATCC 4315生长良好;金黄色葡萄球菌ATCC 25923和大肠杆菌ATCC 25922受到抑制
✓外观特征:脱水培养基为浅米色、自由流动均匀粉末;配制成平板后为浅琥珀色,略显乳光
适用场景
✓医学微生物实验室:用于布鲁氏菌病病人血液、骨髓等临床样本的布鲁氏菌分离,为实验室诊断提供培养依据。
✓兽医检测与畜牧业:用于奶牛、羊、猪等动物流产材料、乳汁及组织样本中布鲁氏菌的分离培养和疫病调查。
✓人畜共患病监测:在养殖场、屠宰企业及相关环境监测中开展布鲁氏菌样本的筛选与分离。
✓科研与教学实验室:用于布鲁氏菌形态学观察、菌株纯化、保存传代以及教学演示中的基础培养环节。
使用方法
✓称取45.0g干粉,加入1L蒸馏水或去离子水中,加热并持续搅拌,使培养基充分溶解至液体澄清、无可见颗粒。
✓将溶液分装至耐热容器中,放入高压灭菌器,在121℃条件下灭菌15分钟。
✓将灭菌后的基础培养基冷却至45-50℃;同时取2瓶布鲁氏菌添加剂(Code81003),用10mL甲醇与无菌蒸馏水按1:1比例配制的溶液溶解,置于36±1℃孵育10-15分钟。
✓在无菌条件下向基础培养基中加入5%-10%灭活马血清、1%-5%无菌葡萄糖以及复溶后的布鲁氏菌添加剂,充分混匀后倾注灭菌培养皿,制成平板。
✓待培养基凝固后,将待检标本接种于平板表面并用无菌弯头玻璃棒涂布均匀,置于36±1℃、含10%-20%二氧化碳的环境中培养72-96小时。
✓培养结束后观察菌落,将直径约1-2毫米、凸起且边缘圆整的可疑菌落挑取用于玻片凝集等后续鉴定。