美德声赖氨酸铁琼脂培养基
产品概述
赖氨酸铁琼脂是一种用于肠杆菌科细菌分离与鉴定的鉴别培养基,其设计思路是把赖氨酸脱羧、赖氨酸脱氨与硫化氢产生三种生化反应整合在同一支斜面深层培养基中。培养基以蛋白胨和酵母浸出物提供氮源与生长因子,以葡萄糖作为可发酵碳源,并加入L-赖氨酸盐酸盐作为反应底物,另含硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵和溴甲酚紫。配制后的培养基呈紫色,pH值为6.7±0.2(25℃),适合在需氧条件下对革兰阴性肠道杆菌进行生化特征观察。
培养过程中,能够产生赖氨酸脱羧酶的细菌会使深层培养基中的赖氨酸脱羧生成尸胺,pH随之升高,深层保持或转为紫色,呈碱性反应;不具备该能力的细菌则发酵葡萄糖产酸,深层呈黄色,呈酸性反应。部分细菌具有赖氨酸脱氨酶,可在斜面表面将赖氨酸氧化脱氨,生成α-酮酸并释放氨,使斜面变为红色。能产生硫化氢的细菌会将硫代硫酸钠还原,与柠檬酸铁铵中的铁离子结合,在斜面顶部形成黑色硫化铁沉淀,便于肉眼判读。
该培养基常用于沙门氏菌属的鉴别,尤其是乳糖发酵型沙门氏菌,包括亚利桑那沙门氏菌,与其他肠道菌的区分。不同菌属在深层产酸、斜面变红以及硫化氢生成方面表现出稳定的差异,配合质控菌株反应数据使用,可对实验结果进行可靠判读。产品以脱水粉末形式提供,按34.1 g/L溶解、分装并经高压灭菌后即可制成短斜面加深层的试管培养基,适用于常规微生物实验室的日常检测与培养基性能验证。
产品特点
✓配方含L-赖氨酸盐酸盐10.0 g/L,可同时观察赖氨酸脱羧酶与赖氨酸脱氨酶两条反应路径,一次接种即可获得多项生化信息
✓含硫代硫酸钠与柠檬酸铁铵指示体系,能够显示硫化氢的生成,并在斜面顶端形成黑色硫化铁沉淀
✓以溴甲酚紫作为pH指示剂,深层由紫色转为黄色、斜面由紫色转为红色等颜色变化直观,便于肉眼判读
✓采用短斜面加深层的分装形式,可用接种针先穿刺深层再划线斜面,兼顾深层与斜面两种反应条件的观察
✓脱水培养基溶解性能良好,34.1 g粉末加入1 L蒸馏水或去离子水,加热至沸腾即可充分溶解
✓产品附质控菌株反应数据,便于实验室开展培养基性能验证、结果比对与人员培训
技术参数
✓产品名称:赖氨酸铁琼脂
✓产品编号:610027 / 620027
✓培养基类型:鉴别培养基,短斜面加深层分装
✓成品pH值:6.7±0.2(25℃)
✓配制浓度:34.1 g/L,使用蒸馏水或去离子水
✓灭菌条件:121℃高压灭菌15分钟
✓培养条件:36±1℃,需氧,18–24小时
✓观察时间:18–24小时及40–48小时
✓脱水培养基外观:自由流动、均匀,米色
✓配制后培养基外观:微乳光、无沉淀,紫色
质控菌株反应
在36±1℃培养18–48小时后的典型反应如下:
✓大肠埃希菌 ATCC 25922:深层紫色、斜面紫色,硫化氢 −
✓鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028:深层紫色、斜面紫色,硫化氢 +
✓肺炎克雷伯菌 ATCC 13883:深层紫色、斜面紫色,硫化氢 −
✓弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 8090:深层黄色、斜面紫色,硫化氢 +
✓奇异变形杆菌 ATCC 25933:深层黄色、斜面红色,硫化氢 −
适用场景
✓食品、饲料及其原料中沙门氏菌属的分离培养与初步生化鉴定
✓临床与公共卫生实验室对肠道致病菌的鉴别培养与菌种筛选
✓水质、环境及生产环节样品中肠杆菌科细菌的检测与筛查
✓乳糖发酵型沙门氏菌,包括亚利桑那沙门氏菌,与其他肠道菌的区分
✓微生物实验室的培养基质量控制、菌株验证及检验人员操作培训
使用方法
✓称取34.1 g脱水粉末,加入1 L蒸馏水或去离子水中
✓加热至沸腾并持续搅拌,直至粉末充分溶解
✓将溶解后的培养基分装至终使用的试管中
✓于121℃高压灭菌15分钟
✓灭菌后使试管倾斜放置,冷却凝固成较短的斜面和较深的深层
✓用接种针从新鲜纯培养物上挑取单个菌落的中心部位,先穿刺至深层底部,再在斜面表面划线接种
✓试管帽松盖以保证需氧条件,于36±1℃培养18–24小时
✓在18–24小时及40–48小时观察深层与斜面的生长和颜色变化,以及斜面顶端的变黑情况
结果判读
✓赖氨酸脱羧酶阳性:深层呈紫色,呈碱性反应,斜面呈紫色;���性:深层呈黄色,呈酸性反应,斜面呈紫色
✓赖氨酸脱氨酶阳性:斜面呈红色;阴性:斜面呈紫色
✓硫化氢阳性:斜面顶端的培养基变黑
✓判读时应结合深层颜色、斜面颜色与硫化氢反应综合判断,并使用新鲜纯培养物进行接种
✓培养时试管帽应松盖以保证需氧条件,培养温度控制在36±1℃