美德声改良半固体RV沙门氏菌增菌培养基基础
产品概述
沙门氏菌是食品链中常见的致病菌之一,其检测通常需要经过前增菌、选择性增菌、分离与确认等步骤。依据ISO 6579-1的方法要求,动物粪便及环境样品中的运动性沙门氏菌可采用改良半固体RV(拉帕波特-瓦西利亚迪斯)培养基进行选择性增菌。该培养基由经典RV增菌液改良而来,以半固体形式兼顾选择性与运动性筛选功能,适用于日常微生物检测流程。本产品为RV培养基基础,使用前需按说明加入新生霉素补充剂。
培养基中的酶消化动物与植物组织、酪蛋白酸水解物提供氨基酸、氮源、碳源、维生素及矿物质;氯化钠维持渗透压平衡;磷酸二氢钾作为缓冲体系;氯化镁提高培养基渗透压;孔雀石绿草酸盐抑制沙门氏菌以外的微生物;新生霉素主要作用于革兰氏阳性菌,进一步增强选择性;琼脂为凝固剂,使培养基呈半固体状态。
在41.5±1℃条件下培养,运动性沙门氏菌可自接种点向外扩散,形成灰白色混浊带,而非运动性杂菌多局限于接种点或受到抑制,从而实现基于运动性的选择性增菌。培养24-48小时后,混浊带可延伸并覆盖大部分平板表面。挑取迁移带外缘的菌液进行亚培养,可转接至XLD琼脂等选择性平板,并通过生化与血清学试验完成推定鉴定与确认。
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 |
|---|
| 610018 | 脱水培养基 | 500g粉末,塑料瓶装 |
| 620018 | 脱水培养基 | 100g粉末,塑料瓶装 |
技术参数
✓产品名称:RV培养基基础(改良半固体拉帕波特-瓦西利亚迪斯培养基基础)
✓产品编号:610018 / 620018
✓主要成分:酶消化动物与植物组织4.6g/L、酪蛋白酸水解物4.6g/L、氯化钠7.3g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、无水氯化镁10.9g/L、孔雀石绿草酸盐0.04g/L、琼脂2.7g/L
✓pH值:5.2±0.1(25℃)
✓使用方式:与新生霉素补充剂配套使用,用于运动性沙门氏菌的选择性增菌
✓培养条件:41.5±1℃,18-27小时;阴性平板可继续培养18-27小时
✓有效期:4年
✓包装规格:610018脱水培养基500g/塑料瓶;620018脱水培养基100g/塑料瓶
✓培养基外观:粉末为自由流动、均匀的蓝色;即用型培养基为微乳光半固体凝胶、蓝色
✓质量控制菌株:肠炎沙门氏菌WDCM00030、鼠伤寒沙门氏菌WDCM00031、大肠埃希氏菌WDCM00013、粪肠球菌WDCM00009
适用场景
✓动物粪便样品中运动性沙门氏菌的选择性增菌与筛查,适用于养殖与兽医相关检测流程
✓环境样品如加工环境涂抹样、废水及表面取样样品的沙门氏菌检测与污染调查
✓食品与饲料生产企业实验室对原料、成品及过程样品的微生物监控与放行检验
✓第三方检测机构与疾病预防控制相关实验室开展沙门氏菌分离、鉴定与确认工作
✓教学与科研实验室中沙门氏菌增菌方法的教学演示、方法学研究与能力验证活动
使用方法
✓称取31.6g粉末,加入1L去离子水或蒸馏水中
✓频繁搅拌并加热,煮沸约1分钟使粉末充分溶解,注意不要进行高压灭菌
✓将溶解后的培养基冷却至45-50℃
✓无菌操作加入1瓶新生霉素补充剂(货号81021,用5mL无菌蒸馏水复溶)的内容物,混合均匀后倾注平板
✓前增菌:按1:9比例将样品加入缓冲蛋白胨水(货号414020)中,例如25g样品加225mL,均质后于36±2℃培养16-20小时
✓接种:取0.1mL前增菌培养物接种RV平板,在培养基表面等距的三个位置各滴加1滴
✓培养:于41.5±1℃培养18-27小时;结果阴性的平板可继续培养18-27小时
结果判读
✓接种点周围出现向外延伸的灰白色混浊带判为运动性沙门氏菌阳性;接种点周围培养基保持蓝绿色判为阴性
✓从阳性平板的迁移带外缘取菌进行亚培养,转接至XLD琼脂(货号10056)及第二种沙门氏菌选择性琼脂,如沙门氏菌显色琼脂(货号11614)
✓对特征性推定沙门氏菌菌落,以生化试验与血清学试验完成确认
注意事项
✓本产品仅供专业人员使用,操作人员须经过培训并具备相应的实验室方法经验,使用前请仔细阅读说明书
✓如偏离说明书中的操作要求,检测结果的可靠性无法保证
✓有关危害信息与安全操作规范,请查阅产品安全数据表(SDS)
✓废弃物的处理应按照当地现行法规及实验室生物安全要求执行