美德声阳离子调节MH II肉汤培养基
产品概述
MH II肉汤(亦称阳离子调节MH肉汤)是一种用于细菌抗菌药物敏感性试验的液体培养基,适用于通过肉汤稀释法对快速生长的需氧菌进行定量药敏检测。该培养基的配方与离子浓度依据CLSI与EUCAST的相关推荐进行调整,可用于测定抗菌药物对受试菌株的体外活性。
培养基中的酪蛋白酸水解物与牛肉浸膏提供氨基酸、氮源、矿物质、维生素与碳源等营养物质,支持微生物生长。配方原料按低胸腺嘧啶与胸腺嘧啶核苷含量进行选择,其判定依据为用甲氧苄啶-磺胺甲噁唑对粪肠球菌进行试验所获得的MIC值。淀粉在培养基中作为保护性胶体,可结合可能存在的毒性分子,并在高压灭菌过程中水解产生少量葡萄糖,作为能量来源。配方中的钙、镁离子浓度依据氨基糖苷类药物与铜绿假单胞菌的试验研究确定,并按ISO/TS 16782的要求将离子浓度调整至规定范围。肉汤稀释法分为宏量稀释与微量稀释两种形式,通过在培养基中加入不同浓度的抗菌药物并接种标准化菌悬液,培养后观察生长情况,从而定量评价抗菌药物对受试菌株的体外作用。
技术参数
✓ 产品名称:阳离子调节MH II肉汤
✓ 产品编号:620218/610218
✓ 方法学:肉汤稀释法(宏量稀释、微量稀释),用于测定MIC
✓ 典型配方:牛肉浸膏3.0 g/L;酪蛋白酸水解物17.5 g/L;淀粉1.5 g/L
✓ 终pH:25°C下7.3±0.1
✓ 钙离子浓度:20–25 mg/L
✓ 镁离子浓度:10–12.5 mg/L
✓ 锰、锌离子浓度:锰低于8 mg/L,锌低于3 mg/L
✓ 适用标准:符合CLSI与EUCAST相关推荐;离子浓度按ISO/TS 16782调整
✓ 脱水培养基外观:细匀粉末,无异物
✓ 配制后培养基外观:淡黄至浅黄色,澄清至微浊
✓ 有效期:脱水培养基4年;管装与瓶装培养基2年
✓ 质控菌株:粪肠球菌WDCM 00087(ATCC 29212;NCTC 12697)、大肠埃希菌WDCM 00013(ATCC 25922;NCTC 12241)、铜绿假单胞菌WDCM 00025(ATCC 27853;NCTC 12903)、金黄色葡萄球菌WDCM 00131(ATCC 29213;NCTC 12973)
✓ 质控培养条件:接种量10–100 CFU/mL,35±2°C需氧培养16–20小时,生长良好
使用方法
✓ 称取22 g脱水培养基粉末,悬浮于1 L蒸馏水或去离子水中,充分混匀
✓ 加热至沸腾并频繁振摇,直至粉末充分溶解
✓ 于121°C高压灭菌10分钟
✓ 在MH II肉汤中对抗菌药物进行倍比稀释,制备浓度系列
✓ 采用直接菌落悬浮法或生长法制备标准化的受试菌悬液
✓ 向各含抗菌药物的管或孔中加入适量校正后的接种物,并混匀
✓ 在35±2°C条件下需氧培养16–20小时
✓ 培养后观察浊度判断生长情况,不出现可见生长的抗菌药物浓度即为该菌对该药物的MIC;参照现行CLSI M100文件判读MIC,并报告敏感、中介或耐药
注意事项
✓ 不得超过标签标示的有效期使用;产品出现污染迹象或任何变质迹象时,不得使用
✓ 标本宜在使用抗菌药物前采集,并尽快送至实验室检查;临床标本不应直接接种到MH II肉汤,受试微生物须先在不选择性固体培养基(如血琼脂或胰酪大豆琼脂TSA)上分离
✓ 操作者应事先了解操作流程的原理及其性能局限,以避免潜在的操作失误
✓ 受营养差异影响,部分菌株可能生长不良或不生长;需要胸腺嘧啶与胸腺嘧啶核苷的微生物可能不生长,链球菌属、嗜血杆菌属与奈瑟菌属等苛养菌在MH II肉汤中生长不良或不生长
✓ 若生长不充分(肉眼无法观察到浊度),MIC值可能无效,应始终设置生长对照管或孔
✓ 标本质量不佳、采集不当、运输不当、实验室处理不当或检测技术局限,均可能导致结果无效