美德声李斯特菌显色选择性琼脂培养基
产品概述
O.A.李斯特菌琼脂是一种显色选择性培养基，配合补充剂使用，用于食品、动物饲料、环境样品以及食品生产和食品处理区域其他材料中单核细胞增生李斯特菌和其他李斯特菌属的分离、鉴别与计数。该培养基采用Ottaviani与Agosti推荐的配方体系，配合O.A.李斯特菌补充剂使用时，符合ISO 11290-1、ISO 11290-2以及FDA-BAM和APHA所载方法的要求，适用于食品链微生物检验中的检测与计数流程。
培养基的营养与选择体系由多组分构成：动物组织酶消化物和酪蛋白酶消化物提供氨基酸、氮源、碳源、矿物质、维生素及其他生长所需营养物质；酵母浸粉提供维生素，尤其是B族维生素；丙酮酸钠与葡萄糖作为能量来源；磷酸盐起缓冲作用；硫酸镁提供二价阳离子与硫酸根；氯化锂作为选择性抑制剂；5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷作为β-葡萄糖苷酶的显色底物；琼脂为凝固剂。
O.A.李斯特菌补充剂由增补剂与选择性补充剂两部分组成，分别用于检测磷脂酶活性并赋予进一步的选择性，其中加入磷脂酰肌醇底物以及萘啶酸、头孢他啶、放线菌酮和多粘菌素B等抗菌成分。
结果判读：单核细胞增生李斯特菌在培养基上形成典型的蓝绿色菌落，菌落周围环绕不透明晕圈；带有或不带晕圈的蓝绿色菌落均视为推定李斯特菌属。采用计数方法时，统计所有推定为单核细胞增生李斯特菌和/或李斯特菌属的菌落。需要进行确认时，可将菌落转接至适当的非选择性琼脂，例如血琼脂、营养琼脂或胰酪大豆酵母浸膏琼脂，随后开展包含阳性与阴性对照的确认试验。
产品特点
✓ 显色鉴别设计：以5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷作为β-葡萄糖苷酶显色底物，单核细胞增生李斯特菌形成蓝绿色菌落并伴有不透明晕圈，便于与其他菌落区分。
✓ 选择性体系：氯化锂与补充剂中的萘啶酸、头孢他啶、放线菌酮、多粘菌素B共同作用，抑制伴随杂菌生长，有利于目标菌的分离。
✓ 双补充剂配置：O.A.李斯特菌补充剂分为增补剂与选择性补充剂，分别用于检测磷脂酶活性和提供进一步选择性，可按实验需要配合培养基使用。
✓ 标准符合性：配合O.A.李斯特菌补充剂使用时，培养基配方符合ISO 11290-1、ISO 11290-2的推荐，并可用于FDA-BAM和APHA所载方法流程。
✓ 样品适用范围广：可用于食品、动物饲料、环境样品以及食品生产和食品处理区域的其他材料，兼顾检测与计数两类用途。
✓ 质量信息完整：随产品提供脱水培养基与制备后培养基的外观描述，以及针对单核细胞增生李斯特菌、英诺克李斯特菌、大肠埃希菌和粪肠球菌等菌株的预期培养结果。
✓ 规格选择灵活：提供500 g与100 g两种脱水培养基包装，均为塑料瓶装粉末，便于按实验室用量选择。
技术参数
✓ 产品名称：O.A.李斯特菌琼脂
✓ 产品编号：610601/620601
✓ 培养基类型：显色选择性琼脂培养基，脱水粉末
✓ 培养基pH：25°C时为7.2±0.2
✓ 配制用量：72 g粉末加入1 L去离子水或蒸馏水
✓ 灭菌条件：121°C灭菌15分钟，冷却至45-50°C后加入补充剂
✓ 培养条件：37±1°C培养24±2 h，再继续培养24±2 h
✓ 有效期：自生产日期起4年
✓ 包装规格：610601：500 g粉末装于塑料瓶；620601：100 g粉末装于塑料瓶
✓ 适用标准：ISO 11290-1、ISO 11290-2；配合补充剂时符合FDA-BAM、APHA所载方法
✓ 脱水培养基外观：均匀、细颗粒、偏白米色
✓ 制备后培养基外观：乳光、黄色
✓ 质控结果：单核细胞增生李斯特菌4b WDCM 00021、1/2a WDCM 00109：生长良好，蓝绿色菌落伴不透明晕圈；英诺克李斯特菌WDCM 00017：蓝绿色菌落无晕圈；大肠埃希菌WDCM 00012、粪肠球菌WDCM 00009：生长受抑制
适用场景
✓ 食品微生物检验实验室开展单核细胞增生李斯特菌及其他李斯特菌属的检测与计数。
✓ 动物饲料的微生物安全检验与质量控制。
✓ 食品生产与食品处理区域的环境样品监测，例如表面涂抹样品和环境取样样品。
✓ 依据ISO 11290-1开展检测流程，或依据ISO 11290-2开展计数流程的检验机构。
✓ 需要参照FDA-BAM或APHA方法进行李斯特菌属检验的实验室与第三方检测单位。
使用方法
✓ 称取72 g粉末，加入1 L去离子水或蒸馏水中。
✓ 加热煮沸并摇动，直至粉末充分溶解。
✓ 于121°C灭菌15分钟，随后冷却至45-50°C。
✓ 无菌操作加入2瓶（40 ml）O.A.李斯特菌增补剂的全部内容物，以及2支（10 ml）O.A.李斯特菌选择性补充剂复溶后的内容物，混合均匀后倾注平皿；选择性补充剂复溶时使用等体积的蒸馏水与乙醇混合液。
✓ 检测方法（ISO 11290-1）：分别使用半Fraser肉汤（货号414000）和Fraser肉汤（货号24131）进行一级和二级增菌，再从两种增菌培养物中划线接种于O.A.李斯特菌琼脂表面，以获得分离良好的菌落。
✓ 计数方法（ISO 11290-2）：使用适当稀释液，例如缓冲蛋白胨水（货号414030）或半Fraser肉汤（货号424010），制备1比9的样品稀释液，用初始悬液直接接种培养基表面，以获得分离良好的菌落。
✓ 于37±1°C培养24±2 h，再继续培养24±2 h。
✓ 结果判读：单核细胞增生李斯特菌形成周围带不透明晕圈的蓝绿色菌落；带或不带晕圈的蓝绿色菌落视为推定李斯特菌属。确认时转接至适当的非选择性琼脂，例如血琼脂、营养琼脂或胰酪大豆酵母浸膏琼脂（货号10432），并进行包含阳性与阴性对照的确认试验。
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 |
|---|
| 610601 | O.A.李斯特菌琼脂脱水培养基 | 500 g粉末，塑料瓶装 |
| 620601 | O.A.李斯特菌琼脂脱水培养基 | 100 g粉末，塑料瓶装 |
美德声李斯特菌显色选择性琼脂培养基