美德声显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂培养基
产品概述
大肠埃希氏菌是水质与食品卫生学评价中的常用指示菌，其检测与计数结果直接关系到样品卫生状况的判定。传统方法需要经过多步确认试验，流程较长。显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂将显色底物与选择性抑制成分结合在同一培养基中，使目标菌在生长过程中直接呈现可辨认的菌落颜色，从而简化检测流程，适用于水样膜过滤法以及食品样品的常规微生物检验。产品供专业实验室体外检验使用，不用于人类疾病或其他健康状况的诊断。
作用原理
培养基的作用原理建立在营养成分与显色底物的协同之上。胰蛋白胨提供氨基酸、氮源、碳源、维生素与矿物质，支持微生物生长；酵母浸粉提供以B族为主的维生素；胆盐第3号抑制革兰阳性菌；磷酸氢二钠与磷酸二氢钾构成缓冲体系；氯化钠维持培养基的渗透压平衡。显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷可被大肠埃希氏菌特有的β-D-葡萄糖醛酸苷酶裂解，释放出蓝色至蓝绿色的显色基团。培养基中还添加了色氨酸，使操作者能够在显色菌落上直接进行靛基质试验，用于结果确认；琼脂作为凝固剂使培养基成形。该产品在方法学上与UNICHIM M.U.1185以及APAT CNR IRSA 7030中的推荐方法相对应，可用于水与食品中大肠埃希氏菌的检测和计数。
产品特点
✓ 以5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷为显色底物，被β-D-葡萄糖醛酸苷酶裂解后形成蓝色或蓝绿色菌落，菌落颜色直观，便于在平板表面直接判读与计数。
✓ 培养基中已加入色氨酸，可在显色菌落上直接滴加柯氏试剂进行靛基质试验，红色出现即为阳性反应，用于结果确认。
✓ 胆盐第3号抑制革兰阳性菌，配合44±0.5°C的需氧培养条件，形成选择性与鉴别性兼具的分离环境。
✓ 产品形式多样，既有60mm即用型平板，采用双层包装、每泡罩2片，也有100g与500g两种规格的脱水培养基，可按实验通量选用。
✓ 脱水培养基按54.0g/L称量，加热煮沸至充分溶解后于121°C高压灭菌15分钟即可倒板，配制流程清晰，便于实验室自行制备。
✓ 培养基终pH为7.0±0.2（25°C），由磷酸盐缓冲体系维持，适合大肠埃希氏菌的生长与酶促显色反应。
✓ 方法学与UNICHIM M.U.1185、APAT CNR IRSA 7030的推荐方法相对应，便于实验室纳入既有的水与食品检测流程。
技术参数
✓ 培养基类型：选择性、鉴别性显色培养基
✓ 目标微生物：大肠埃希氏菌
✓ 显色底物：5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷 0.06 g/L，经β-D-葡萄糖醛酸苷酶裂解显蓝色至蓝绿色
✓ 培养条件：需氧培养，44±0.5°C，18-24小时
✓ 配制浓度与pH：54.0 g/L；终pH 7.0±0.2（25°C）
✓ 脱水培养基外观：自由流动、均一的米色粉末
✓ 配制后培养基外观：浅琥珀色，轻微乳光
✓ 有效期：脱水培养基2年；即用型平板4个月
✓ 规格包装：60mm平板（20个，泡罩每2片、双层包装）；脱水培养基100g、500g
典型配方（每升纯化水）
✓ 胰蛋白胨：20.0 g/L
✓ 酵母浸粉：5.0 g/L
✓ 胆盐第3号：1.5 g/L
✓ 磷酸氢二钠：5.0 g/L
✓ 磷酸二氢钾：1.5 g/L
✓ 氯化钠：5.0 g/L
✓ 5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷：0.06 g/L
✓ 色氨酸：1.0 g/L
✓ 琼脂：15.0 g/L
质量控制（预期培养反应）
✓ 大肠埃希氏菌 WDCM 00013（ATCC 25922；NCTC 12241）：接种50-100 CFU，18-24小时/44±0.5°C，生长良好（生产率比值≥0.5），蓝绿色菌落，靛基质阳性
✓ 粪肠球菌 WDCM 00009（ATCC 19433；NCTC 775）：接种10⁴-10⁶ CFU，18-24小时/44±0.5°C，受抑制
✓ 鼠伤寒沙门氏菌 WDCM 00031（ATCC 14028；NCTC 12023）：接种10³-10⁴ CFU，18-24小时/44±0.5°C，生长，无色菌落，靛基质阴性
✓ 生产率比值为0.5相当于50%的回收率，具体批次结果以对应的批号分析证书为准。
适用场景
✓ 饮用水、水源水等低本底菌群水样的膜过滤法检测：取100mL样品经0.45μm滤膜过滤后贴于培养基表面培养。
✓ 食品与食品原料的大肠埃希氏菌检测与计数，可按样品性状选择涂布法、倾注法或平板划线法接种。
✓ 第三方检测机构、疾病预防控制与水质监测实验室的常规微生物检验工作。
✓ 食品、饮料及水产加工企业的实验室原辅料与成品微生物监控。
✓ 高校与科研机构微生物学教学及方法学研究中的选择性分离与鉴别培养。
使用方法
✓ 脱水培养基配制：称取54.0g粉末，悬浮于1L蒸馏水或去离子水中，加热至沸腾并搅拌至充分溶解。
✓ 灭菌与分装：于121°C高压灭菌15分钟，取出后充分混匀，倾注至无菌终容器中冷却凝固。
✓ 平板准备：使用前确认平板表面无可见冷凝水；即用型平板恢复至使用状态。
✓ 水样检测：取100mL样品通过孔径0.45μm的滤膜过滤，将滤膜转移至培养基表面。
✓ 其他接种方式：样品亦可采用涂布法、倾注法或直接在培养基表面划线接种。
✓ 培养：置于44±0.5°C条件下需氧培养18-24小时。
✓ 结果判读：蓝色或蓝绿色菌落且靛基质反应阳性者计为大肠埃希氏菌；在菌落上滴加数滴柯氏试剂，出现红色即为靛基质阳性。结果以CFU/mL表示，并计入稀释倍数。
结果说明
部分β-葡萄糖醛酸苷酶阴性菌株（如大肠埃希氏菌O157）在本培养基上形成无色菌落；因菌株营养需求差异，个别菌株可能生长不良或不生长。样品质量、采样与运输、实验室处理等环节均可能影响结果。危害信息与安全操作请查阅安全数据表；废弃物的处置须符合现行与地方相关法规要求。
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 | 产品形式 |
|---|
| 163722 | 显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂培养基平板 | 60mm，20个平板，泡罩每2片，双层包装 | 即用型平板 |
| 620602 | 显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂脱水培养基 | 100g/瓶 | 脱水培养基 |
| 610602 | 显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂脱水培养基 | 500g/瓶 | 脱水培养基 |
美德声显色大肠埃希氏菌葡萄糖醛酸苷琼脂培养基